技術(shù)文章
Technical articles如何正確選擇毛細(xì)管柱
柱長度的選擇分辨率與柱長的平方根成正比。在其他條件不變的情況下,為取得加倍的分辨率需有 4 倍的柱長。較短的柱子適于較簡單的樣品,尤其是由那些在結(jié)構(gòu)、極性和揮發(fā)性上相差較大的組分組成的樣品。
一般來說,15m 的短柱用于快速分離較簡單的樣品,也適于掃描分析;
30m 的色譜柱是zui常用的柱長,大多數(shù)分析在此長度的柱子上完成;
50m、60m 或更長的色譜柱用于分離比較復(fù)雜的樣品。
應(yīng)該注意,柱長增加,分析時(shí)間也相應(yīng)的增加。
柱內(nèi)徑的選擇
柱內(nèi)徑直接影響柱子的效率、保留特性和樣品容量。小口徑柱比大口徑柱有更高的柱效,但柱容量更小。0.25mm:具有較高的柱效,柱容量較低。分離復(fù)雜樣品較好。
0.32mm:柱效稍低于 0.25mm 的色譜柱,但柱容量約高 60%。
0.53mm:具有類似于填充柱的柱容量,可用于分流進(jìn)樣,也可用于不分流進(jìn)樣。
當(dāng)進(jìn)行痕量分析時(shí),選擇大口徑毛細(xì)管柱較為合適。
液膜厚度的選擇
液膜厚度影響柱子的保留特性和柱容量。厚度增加,保留時(shí)間也增加。
0.1-0.2um:薄液膜厚度的毛細(xì)管柱比厚液膜的毛細(xì)管柱洗脫組分快,所需柱溫度低,且高溫下柱流失較小,適用高沸點(diǎn)的化合物的分析。
0.25-0.5um:常用的液膜厚度。
0.6-5.0um:厚液膜,對分析低沸點(diǎn)的化合物較為有利。
毛細(xì)管色譜柱安裝步驟如下:
步驟 1:檢查氣體過濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管等
檢查進(jìn)樣墊和氣體過濾器,保證輔助氣和檢測器用氣通暢有效。如果以前做過沸點(diǎn)較高的化合物,需要將進(jìn)樣口襯管清洗或更換。
步驟 2:將螺母和卡套裝在柱上,并將色譜柱兩端口小心切平
在色譜柱的一端裝上相應(yīng)的螺母和卡套,此時(shí)色譜柱端口無前后之分,色譜柱支架的支撐部分應(yīng)總是朝向著柱箱門。安裝好螺母和卡套后,將色譜柱端口切平,并用放大鏡進(jìn)行檢查,以確認(rèn)切口和管壁成直角,并且沒有殘留的碎屑,沒有毛邊或不平的切割面。
步驟 3:將色譜柱連于進(jìn)樣口上
通常來說,色譜柱的頂端應(yīng)保持在進(jìn)樣口襯管的中下部,當(dāng)進(jìn)樣針穿過隔墊*插入進(jìn)樣口后,如果針尖與襯管中的色譜柱頂端相差 1-2cm,這就是較為理想的狀態(tài)。從色譜柱架上取出需要連接的足夠的長度,并按步驟
2 切割柱子,連接到進(jìn)樣口。避免用力彎曲壓擠毛細(xì)柱,并小心不要讓標(biāo)記牌等有鋒利邊緣的物品與色譜柱接觸磨擦,以防柱身斷裂或受損。將色譜柱正確地嵌入進(jìn)樣口后,用手把連接螺母擰上,用手?jǐn)Q緊后用扳手再擰1/4-1/2 圈。
步驟 4:接通載氣
載氣必須為高純氮?dú)猓ɑ蚝猓?,純度達(dá) 99.999%,使用極性柱時(shí)(如 FFAP、PEG-20M 等),載氣加脫氧管進(jìn)一步脫氧,這樣可延長柱子的使用壽命。
當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口連接好后,接通載氣。調(diào)節(jié)柱前壓力以得到合適的載氣流速。將色譜柱的另一端(空端),插入裝有己烷的樣品瓶中,正常情況下,我們可以看見瓶中穩(wěn)定持續(xù)的氣泡。如果沒有氣泡,就要重新檢查一下載氣裝置和流量控制器等是否安裝*或設(shè)置正確,并檢測一下整個(gè)氣路有無泄漏。等所有問題解決后,將色譜柱端口從瓶中取出,擦試干凈,保證柱端口無溶劑殘留,再進(jìn)行下一步安裝。
步驟 5:將色譜柱連于檢測器上
其安裝和所需注意的事項(xiàng)與以上色譜柱與進(jìn)樣口聯(lián)接(步驟 3)部分所講述的大致相同。安裝時(shí)要注意色譜柱末端要高于尾吹點(diǎn),或按照色譜儀說明書安裝。
步驟 6:進(jìn)行氣體檢漏
在色譜柱加熱前,要對 GC 系統(tǒng)進(jìn)行檢漏。建議使用 1∶1 的異丙醇/水的混合溶液進(jìn)行檢查。
步驟 7:色譜柱的老化
色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,就可以對色譜柱進(jìn)行老化了。將色譜柱程序升溫至zui高使用溫度的 30℃ 以下,恒溫 30 分鐘。這樣柱子內(nèi)吸附的組份會(huì)被吹出,以免影響您的分析。
zui后,將色譜柱的溫度降低至所需要的溫度,即可進(jìn)行實(shí)際樣品的分析。